大家好,小甜来为大家解答以下的问题，关于免疫共沉淀的图，免疫共沉淀图怎么看这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧！

1、分清Input和IP，再者就看用什么抗体IP。

2、Input样品中有A和B蛋白，如果用A蛋白的抗体IP，A蛋白可以富集，在IP的样品中若同样可以检测到B蛋白的存在，说明A和B蛋白互作。

3、将预处理过的10μl protein A 琼脂糖珠加入到和抗体孵育过夜的细胞裂解液中4°C缓慢摇晃孵育2-4h，使抗体与protein A琼脂糖珠耦联。

4、免疫沉淀反应后，在4°C 以3,000 rpm 速度离心3 min，将琼脂糖珠离心至管底；将上清小心吸去，琼脂糖珠用1ml裂解缓冲液洗3－4次；最后加入15μl的2×SDS 上样缓冲液，沸水煮5分钟。

5、实验过程：（1）转染后24-48 h 可收获细胞，加入适量细胞裂解缓冲液（含蛋白酶抑制剂），冰上裂解30min, 细胞裂解液于4°C， 最大转速离心30 min后取上清。

6、（2）取少量裂解液以备Western blot分析，剩余裂解液加1μg相应的抗体加入到细胞裂解液，4°C缓慢摇晃孵育过夜。

7、（3）取10μl protein A 琼脂糖珠，用适量裂解缓冲液洗3 次，每次3,000 rpm离心3 min。

本文分享完毕，希望对大家有所帮助。